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| (1) 실험 제목 : Plasmid DNA preparation
(2) 실험 목적 : Ampicillin에 대하여 저항성을 지닌 E. coli (XLI-Blue, Amp-r) 의 plasmid
DNA【pBluescript SKⅡ(+)】를 isolation 한다.
(3) 실험 원리 :
Plasmid DNA를 정제하기 위해서 여러 가지 방법들이 사용되는데 공통적으로 다음의 세 과정- 미생물의 배양과 플라스미드 증폭 ; 미생물 수거와 cell lysis ; plasmid DNA 정제-을 거친다.
DNA를 분리.. |
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| Plasmid Purification
1. 실험 목적
①plasmid의 화학적 분리법을 익힌다.
②plasmid의 정의와 특징을 알아본다.
③균의 pure culture에 대해 알아본다.
④전기영동, 원심분리 등의 사용법을 익힌다.
2.실험 원리
①Bacterial DNA는 plasmid DNA보다 훨씬 크다.
②Bacterial DNA는 여러군데가 잘려진 linear DNA 인 반면에 plasmid는 covalently covalently closed circular DNA이다. 따라서 ephidium bromide .. |
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| Title : Mini Preparation
Objective : DNA의 크기차이에 의해 분리하는 방법인 alkaline lysis method를 이용하여 정제된 DNA의 양을 불린다.
Introduction
유전자 재조합은 DNA를 목적에 따라 적절히 자르고 붙여서 유전물질을 원하는 형태로 개조시키는 과정이다. 가장 기본적인 DNA조작기법인 재조합DNA(recombination DNA) 기술은 필요로 하는 외부 DNA단편을 vector라고 부르는 운반자 plasmid DNA.. |
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| ․제 목: Mini-Prep (Hybrid-Q Plasmid Rapid prep Kit)
1.실험목적
Mini Prep이란 DNA-isolation에 있는 원리 중 하나로 Plasmid DNA분리에 사용되는 방법이며 많은 후보를 빠른 시간 내에 분석하는 방법이다. Prep은 Prepartion의 약자.DNA를 소량으로 추출한다는 의미. 주로 이용되는 Alkylation lysis(denaturation)법과 boiling method, Iithium method법이 있다.
2.실험원리
DNA와 plasmid의 고유 .. |
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| Plasmid DNA Purification
1. 서론
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| Plasmid 분리 실험 Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동
1. Purpose
E.coli를 배양해 플라스미드를 분리하고, 분리한 플라스미드를 직접 만든 Agarose gel을 이용하여
전기 영동한다.
2. Introduction
● Plasmid DNA 분리의 원리
주로 mini-prep이라고 부르는 이 방법은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법이다. 가장 보편적으
로 사용되는 방법인 Alkali lysis method이다. 기본적인 원리는 그림에서.. |
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| PURIFICATION OF PLASMID DNA
1. subject
bacteria의 plasmid에 대해 알아보고 DNA의 구조에 의한 추출 원리를 이해한다.
2. introduction
가. plasmid세균세포내에서 염색체와 독립적으로 존재하며 증식할 수 있는 환형DNA. 모든 플라스미드는 복제 개시점이 될수 있는 적어도 한 개의 DNA염기서열을 가지며 큰 플라스미드는 자체에 복제 효소를 가지기도 한다. 세균의 생존에 필수적인 유전정보를 가지.. |
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| plasmid DNA 추출
1. 서론
분자생물학의 도움으로 생물체 내의 여러 가지 생화학적 반응의 조절과 질병의 치료에 대한 이해가 분자적 수준에서 이루어지고 있다. DNA의 생물체 내에서의 이러한 작용이 밝혀짐에 따라 그 중요성이 더욱 부각되었고, 이 DNA를 연구하는 분자생물학은 좀 더 나은 결과를 위해서 함께 발전해 왔다. 예컨대, 인슐린의 대량생산을 위한 Escherichia Coli 의 cloning vector로의.. |
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| 원형 DNA인 plasmid DNA
서론
[1]plasmid란
세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다.
plasmid의 특징
1)원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA).. |
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| Title : Mini Preparation
Objective : DNA의 크기차이에 의해 분리하는 방법인 alkaline lysis method를 이용하여 정제된 DNA의 양을 불린다.
Introduction
유전자 재조합은 DNA를 목적에 따라 적절히 자르고 붙여서 유전물질을 원하는 형태로 개조시키는 과정이다. 가장 기본적인 DNA조작기법인 재조합DNA(recombination DNA) 기술은 필요로 하는 외부 DNA단편을 vector라고 부르는 운반자 plasmid DNA.. |
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| 실험 제목 : 플라스미드 DNA 분리
플라스미드 DNA 분리-Harvestingstep
플라스미드 DNA 분리-Resuspens ionstep
플라스미드 DNA 분리-Lys isstep
플라스미드 DNA 분리-Bindingstep
플라스미드 DNA 분리-Washstep
플라스미드 DNA 분리-Elution
플라스미드 DNA 분리
Ⅰ. 기본정보
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. 플라스미드 (Plasmid) DNA
2. Plasmid DNA 분리
3. Plasmid DNA 정제
Ⅲ. 실험재료 및 방법 (.. |
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분리, 늘다, dna, plasmiddna, 방법, plasmid, 실험, 세포, sds, 넣다, 대장균, 박테리아, 사용, eb, 침전, 세포벽, 유전자, a, 내, 단계 |
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| 생물학실험 - DNA 추출, PCR의 원리 및 실험
[실험 방법]
-DNA 추출
1. Solution 1
2. Solution 2
3. Solution 3
4. Washing
5. Elution
-PCR
1. PCR tube에 dNTPs buffer 4 l와 reaction buffer 5 l를 넣는다.
2. Template DNA 1 l를 넣고 forward, reverse primer를 각각 0.5 l 씩 넣는다.
3. DNA polymerase 1 l를 넣는다.
4. 증류수 37 l를 넣고 잘 pipetting 해 준다.
5. PCR machine의 well에 tube를.. |
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| [생물학실험보고서]
1. 실험 제목 : DNA work
2. 실험 목적 : 세균의 세포벽을 파괴하고 plasmid DNA를 분리한다. 분리한 plasmid DNA를 형질전환을 시키고 배지에서 키운다. 배지에서 키운후 제한효소를 이용해 잘라낸뒤 전기영동을 시켜서 관찰한다.
3. 재료 :
-Echerichia coli(Competent cell : DH5), plasmid DNA(pUC19 vector, 마이크로 피펫, 소형 원심분리기, E-tube, Ice, plasmid DNA purifica.. |
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| Ligation
Transformation
Cloning vector
목적인 DNA를 삽입하여 대장균 등에서 증폭, 유지하기 위한 매개체로, vector DNA는 제한효소로 절단하여 상보적인 절단부위를 갖는 목적으로 하는 DNA 단편을 삽입하여 연결하고 숙주균에 도입할 수 있다
목적 DNA 단편을 연결한 vector DNA는 숙주균이 증식됨에 따라 복제하여 목적 DNA단편을 대대로 유지할 수 있다
Cloning vector의 종류
- Plasmid : pBR32.. |
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