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| 1. 실험목적
DNA의 정량방법에 대하여 습득하고, 온도에 따른 변화를 확인함으로써 DNA의 생화학적 특성을 이해한다.
2. 실험원리
1) Nucleotide 의 구성 물질 및 각각의 구성 물질에 대해 설명하시오.
누클레오티드(Nucleotide)는 핵산(Nucleic acid)을 구성하는 단위체로서 Nucleoside (Ribose+Base) + Phosphate 로 구성되어 있다. DNA 혹은 RNA에서는 5탄당의 종류(디옥시리보오스 혹은 리보오스)와 염.. |
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| 형질전환 실험 - 대장균 DNA 전기영동 관찰
◆준비물
아이스버킷
아이스
Competent cell
SOC
항온수조
E tube
원심분리기
Colume tube
P1 250ml
P2 250ml
N3 350ml
PB 500ml
PE 750ml
EB 50ml
◆실험목적
LB plate(0.01% ampicillin)에 도말했다.
sample배지도 만들었다.
플라스미드가 들어갔는지 확인했다.
band가 나오는지 유무확인 했다.
DNA loading buffer를 이용해서 size크기를 비교해보았다.
◆가.. |
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| 원형 DNA인 plasmid DNA
서론
[1]plasmid란
세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다.
plasmid의 특징
1)원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA).. |
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| DNA 증폭실험
1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전화체 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하.. |
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| 1. 실험제목 : 단백질과 DNA의 정량
2. 실험목적 :
- 단백질을 구성하는 아미노산의 구조와 특성을 이해하고 아미노산의 특성을 이용한 몇 가지 단백질 정량 방법을 이해한다
- 대표적인 단백질 정량방법인 Bradford assay와 Lowry method를 이용하여 단백질을 정량 한다
- DNAdml 구조 및 DNA를 구성하는 네 가지 염기의 구조와 특성을 이해하고 DNA의 정량 방법과 순도결정 방법을 실험한다
3. 실험원리
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| Transformation의 원리
E.coli는 linear 또는 circular DNA를 받아들일 수 있는데, 이러한 과정을 transformation이라 하며 다음과 같은 단계를 거쳐 이루어진다. E.coli cell이 DNA를 uptake 할 수 있는 상태(competent)로 만들어 주기위해 E.coli cell을 Ca과 같은 multivalent ion의 존재 하에 0℃에서 incubation한다. 이때, cation은 E.coli cell membrane에 존재하는 lipid의 negatively charged phosp.. |
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| SOUTHERN BLOTTING
1. 원리
써던 블롯팅은 1975년 써던(Southern)에 의하여 고안된 유전자 연구기법이기 때문에 그렇게 명명하였다. 사람의 유전자를 제한요소로 절단하면 여러 크기의 DNA절편이 생긴다. 다양한 절편을 전기영동하면 절편의 크기에 따라 분리된다. 한천 겔에 있는 DNA를 흡착지로 이전하면, 한천 겔에 있는 위치와 정확하게 일치하는 곳에 DNA절편이 있게 된다. 겔에서 흡착지로 이전시키.. |
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| TQM(전사적 품질관리)의 실행
목차
*전사적 품질관리의 실행
1.최고경영자의 참여
2.종업원의 몰입
1)종업원 권한부여
2)종업원 훈련
3)팀워크
3.마케팅감사의 실시
4.벤치마킹
1)벤치마킹의 과정
(1)개선이 필요한 과정 파악
(2)내부과정의 분석
(3)개선의 실행
2)지속적인 개선작업
(1)소요시간 단축
(2)편차 축소
(3)낭비요소 제거
...이하 생략(미리보기 참조) |
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| 1. Inside PCR reaction
PCR의 기본적인 원리를 이해하기 위해서 각각의 step 단위로 살펴보기로 한다. PCR machine은 단순히 온도를 정해진 program에 따라 올렸다 내렸다 하는 장치에 불과하다. 즉 PCR은 온도에 따라 denaturation, annealing, extension의 step이 한 cycle을 이루고 이러한 cycle들이 30회 정도 반복되어 지는 것이다.
2.Components of PCR
(1) Primer set
Primer set은 forw.. |
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| 분자생물학자들이 수행하는 가장 중요한 기술은 DNA 조각을 정확히 염기 배열하는 DNA 염기서열 결정법일 것이다. DNA 염기서열 결정법은 30여 년간 발전 및 이용되어왔으나, 1970년대 후반에 들어서야 빠르고 효과적인 염기서열 결정이 가능케 되었다.
그 중 대표적인 방법이 영국의 F. Sanger가 개발한 사슬 종결법(chain termination method)이다. Sanger method는 고전적인 염기 서열 분석 방법으로 약 .. |
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| Okazaki fragment의 존재 증명
DNA replication에서 daughter strand에서 leading strand는 연속으로, lagging strand는 short fragment를 형성하면서 불연속적으로 합성된다. 이중 lagging strand에 형성되는 short fragment를 Okazaki fragment라고 한다. Okazaki 박사는 이를 E.coli 실험으로 증명하였다.
thymine이 불필요한 박테리아나 T4 phage에 감염된 cell을 pulse label하기 위해 -thymine (14.. |
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| DNA구조의 발견: 최고는 아직 오지 않았다
Index
BMJ 해석내용 요약
왓슨과 크릭의 DAN구조의 발견은 새로운 치료의 가능성의 세계을 열게했다.
과거 천년간의 과학적인 발견 때문에 DNA 구조의 설명은 높은 순위에 올랐다. DNA 구조 발견의 효과는 아직 최고수준에 도달하지 못했었다. 하지만 그 수준에 오르자 마자 DNA는 말할수 없을 정도로 강해졌다.
우리가 전형적인 영국의 말에 대한 이러한 제조에 .. |
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| ※ RT-PCR-ELISA 대해서..
※ PCR (Polymerase Chain Reaction)
유전자 진단 방법중 하나로 특정 DNA 영역을 시험 내에서 효소에 의해 증폭하는 방법이다. PCR이 등징하기 전, DNA 진단을 위해서는 하프로이등당 30억개의 염기쌍으로 이루어지는 사람의 게놈 DNA를 재조합 DNA 기술을 이용한 유전자의 클론닝이 필요하였다. 이러한 이유에서 대장균이나 파지에 대한 지식이 많이 필요하였으며, 시간과 노력.. |
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| DNA를 분리, 정제하여 확인하는 방법으로는 아가로스 젤을 이용하는 전기영동법이 보편적으로 사용된다.
TotalcellDNA 분리 후 염색체 DNA와 플라스미드 DNA를 분리시킨다.
박테리어 파지 DNA의 분리
파지입자로부터 DNA의 분리
M13DNA의 분리
ds DNA(dsRF) 분리 : 플라스미드 분리 방법과 동일
ss DNA 분리
DNA의 분리 범위(kb)
Ⅰ. 기본정보
Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. PCR (polymerase chain reaction.. |
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dna, 분리, 젤, 늘다, 단백질, 사용, 아가, 크기, 이동, 가다, 전기, 세포, 분자, 영동, 원심, 방법, 때문, 밀도, 프라이머, 경우 |
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| 분자유전학
Gene (유전자)
- 하나의 단백질을 만들기 위해 필요한 유전정보를 담고 있는 최소의 유전단위
Central dogma
유전정보를 담고 있는 유전물질 (DNA)을 바탕으로 유전정보의 전달자인 RNA를 통해 세포의 기능 유지에 필요한 성분인 Protein을 이루는 아미노산 배열이 결정됨
- 복제 (Replication)
- 전사 (Transcription)
- 번역 (Translation)
유전물질의 최초 규명
- Griffith의 Streptoc.. |
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