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단백질의 검출
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1. 실험제목 : 단백질의 검출
2. 목적 : 생명현상에 있어서 대단히 중요한 유기화합물의 하나인 단백질을 발색 반응을 이용하여 화학적으로 검출하여 본다.
3. 이론
* 밀론반응(MILLON REACTION)
단백질을 검출하는 발색반응의 하나. 밀론 시약을 시약에 첨가하면, 단백질이 들어있는 경우 에는 백색침전이 생기고, 이것을 60-70℃로 가열하면 벽돌색으로 변한다.
이러한 반응은 단백질을 구성하고 있는 아미노산인 티로신, 이옥시페니알라닌 등의 페놀고리 가 수은 화합물을 만들고, 아질산에 의하여 느트로소화되어 착색된 수은착염으로 되기 때문인
것으로 알려져 있다. 따라서 단백질이 아니더라도 페놀이나 살리실산등도 발색한다. 밀론 시 약은 질산수은(II) 및 아질산을 포함한 질산용액인데 예를 들면 수은 10g을 진한 질산 20㎖에 천천히 가열하여서 녹인다음, 2배의 양의 물로 희석시키면서 얻을 수 있다.
* 뷰렛반응
단백질이나 펩티드의 발색반응의 하나, 시료의 수용액에 수산화나트륨 NaOH의 수용액을 소량
가하여 알카리성으로 하고 여기에 황상구리 CuSO45H2O를 5%로 한 수용액을 가하면 적자색 을 띤다. 단백질이나 펩티드만이 아니고 부렛 H2NCONHCONH2라도 색이 나타나므로 이렇게 부른다. 일반적으로 1개의 탄소원자 또는 질소원자를 사이에 두고 2개의 CONH기를 가진 것 이나 직접 2개의 CONH기등이 결합하는 것에서 불 수 있으며 트리펩티드 이상의 폴리펩트디 사슬을 가진 것이 발색한다. 또 이 반응에서 의하여 발생하는 물질은 이 반응에 의하여 생성 하는 비스(뷰타렛)구리(II)산나트륨 Na2[Cu(C2H3O2N3)]이다
* 크산토프로테인 반응
단백질의 발색반응의 하나. 시료에 소량의 질산을 가하여 몇분간 가열하면 황색이 되고 다시
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2011.03.10
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