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| 일반생물학 - 대장균의 DNA 추출과 정량에 대한 실험 보고서
1. Abstract
이번 실험은 우리가 이론상으로만 알고 있던 DNA를 직접 추출해 눈으로 관찰해 봄으로써 DNA에 대한 이해를 높이고 겔로딩 과정을 익혀볼 수 있는 실험이다. 그래서 이번 실험에는 구하기가 쉽고 실험하기 안전한 대장균의 DNA를 직접 추출해보고, 전기영동을 한 뒤 UV lamp를 통해 관찰해 보았다.
먼저, 대장균을 원심 분리시켜.. |
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| DNA(deoxyribo nucleic acid). 눈에 보이지도 않는 이 작은 물질은 만물의 영장인 인간을 비롯하여 매우 하등한 박테리아에 이르기까지 생물의 생장과 진화에 엄청난 영향을 끼치는 유전에 있어서의 key이다. 2차 대전 직후 전 세계의 많은 생리학, 결정학, 화학자들의 관심은 DNA의 구조를 밝히는 데 집중되었다. 그 때까지만 하더라도 이들은 DNA가 어떤 물질이며, 얼마나 중요한지를 몰라서, 처음에는 서.. |
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| DNA 추출 및 PCR PCR 결과 확인(전기영동)
1. 실험 목적(Purpose of experiment)
(1) 쥐의 근육세포에서 DNA를 추출하여 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, PCR) 실험에 이용할 product를 만든다.
(2) 지난 11주차에 추출한 DNA의 PCR결과를 전기영동을 통해 확인한다.
2. 배경지식(Background knowledge)
1-1. DNA의 기능
세포의 핵내에 존재하는 유전자 물질로 의 머리글자. 유전자는.. |
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| PCR 검사
실험 목표
DNA와 PCR에 대하여 이해하고 직접 특정 유전자를 증폭 해 본다.
실험 이론
DNA(deoxyribonucleic acid) :
핵산(nucleic acid)의 일종으로, 세포내에서 생물의 유전정보를 보관하는 물질
이중나선구조를 이루며 각 나선은 뼈대와 염기로 구성된다.
뼈대는 단당류인 디옥시리보스(deoxyribose)에 인산기(phosphate)가 결합된 형태이다.
염기(base) 퓨린 : 아데닌(A), 구아닌(G)
피리.. |
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| 생명화학 실험 Report
(RT-PCR, Bradford assay, SDS page,
Genomic DNA prep)
1.Introduction
RT-PCR
DNA 에서는 exon과 intron이 있으므로 DNA를 template로 하는 경우에는 exon과 intron이 모두 증폭될 수 있다. 하지만 intron은 exon에 비해서 매우 크기 때문에 exon 중에 몇 개를 한꺼번에 증폭하려면 DNA로는 힘들다. 더구나 intron sequence는 일부를 제외하고는 중요성이 떨어진다고 인식되어 밝.. |
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| 1. Abstract Introduction
DNA 절편을 클로닝하기 위한 방법들의 공통된 특징 중 하나는 박테리아와 플리스미드를 이용하는 것이다. 박테리아 플라스미드는 비교적 작고, 염색체로부터 분리된 상태로 복제하는 원형의 DNA라는 것을 설명하였다. 플라스미드는 몇 개의 우전자만 가지고 있고 특정조건에서 박테리아를 배양할 때 유용하게 사용된다. 실험실에서 유전자나 DNA 절편을 클로닝하기 위해서는, 먼.. |
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| 원형 DNA인 plasmid DNA
서론
[1]plasmid란
세포 내에서 핵이나 염색체와 독립적으로 존재하면서 자율적으로 자가증식해 자손에 전해지는 유전요인이다. 1952년에 미국의 유전학자 J.레더버그가 세균류의 염색체 이외의 유전요인을 플라스미드라고 명명했는데, 최근에는 진핵생물도 포함해 세포질 인자와 같은 뜻으로 흔히 쓰인다.
plasmid의 특징
1)원형의 이중가닥 DNA(circular double-standed DNA).. |
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| 형질전환 실험 - 대장균 DNA 전기영동 관찰
◆준비물
아이스버킷
아이스
Competent cell
SOC
항온수조
E tube
원심분리기
Colume tube
P1 250ml
P2 250ml
N3 350ml
PB 500ml
PE 750ml
EB 50ml
◆실험목적
LB plate(0.01% ampicillin)에 도말했다.
sample배지도 만들었다.
플라스미드가 들어갔는지 확인했다.
band가 나오는지 유무확인 했다.
DNA loading buffer를 이용해서 size크기를 비교해보았다.
◆가.. |
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| DNA 증폭실험
1. 실험 목적
생명공학의 기초가 되는 분자 생물학의 기본 기술인 DNA를 다루는 기술을 알아본다.
미생물에서 Plasmid DNA를 분리하고, PCR을 이용하여 DNA를 증폭하고, 제한효소를 이용하여 DNA를 절단한 후 Mini Gel Unit를 이용하여 전기영동법에 의해 DNA를 분리하고 확인한다. Plasmid DNA를 이용하여 미생물 형질전환을 한 후 미생물 형질전화체 선별하는 기술까지 분자생물학을 공부하.. |
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| PURIFICATION OF PLASMID DNA
1. subject
bacteria의 plasmid에 대해 알아보고 DNA의 구조에 의한 추출 원리를 이해한다.
2. introduction
가. plasmid세균세포내에서 염색체와 독립적으로 존재하며 증식할 수 있는 환형DNA. 모든 플라스미드는 복제 개시점이 될수 있는 적어도 한 개의 DNA염기서열을 가지며 큰 플라스미드는 자체에 복제 효소를 가지기도 한다. 세균의 생존에 필수적인 유전정보를 가지.. |
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| Plasmid DNA Purification
1. 서론
.... |
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| [생물학실험보고서]
1. 실험 제목 : DNA work
2. 실험 목적 : 세균의 세포벽을 파괴하고 plasmid DNA를 분리한다. 분리한 plasmid DNA를 형질전환을 시키고 배지에서 키운다. 배지에서 키운후 제한효소를 이용해 잘라낸뒤 전기영동을 시켜서 관찰한다.
3. 재료 :
-Echerichia coli(Competent cell : DH5), plasmid DNA(pUC19 vector, 마이크로 피펫, 소형 원심분리기, E-tube, Ice, plasmid DNA purifica.. |
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| 차례
1 SUMMARY
DNA는 같은 축을 가지는 각각의 꼬인 두개의 나선 사슬 구조이다.
Cf) Fraser의 3중 사슬 나선 구조
각각의 사슬은 B-D-DNA 의 3’과 5’에 phosphodiester 결합을 가진다.
염기는 나선의 안쪽에 위치하고, 바깥쪽에는 phosphate그룹이 위치한다.
각 사슬의 인접한 잔여물은 서로 36도의 각을 이루며 10개마다 반복된다.
Purine Group과 Pyrimidine Group이 상보적으로 결합한다.
한쪽 .. |
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| Title : Mini Preparation
Objective : DNA의 크기차이에 의해 분리하는 방법인 alkaline lysis method를 이용하여 정제된 DNA의 양을 불린다.
Introduction
유전자 재조합은 DNA를 목적에 따라 적절히 자르고 붙여서 유전물질을 원하는 형태로 개조시키는 과정이다. 가장 기본적인 DNA조작기법인 재조합DNA(recombination DNA) 기술은 필요로 하는 외부 DNA단편을 vector라고 부르는 운반자 plasmid DNA.. |
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