낙농미생물학 및 실험-Use of selective(획선평판법) differential Media(분별배지)

낙농미생물학 및 실험-Use of selective(획선평판법) differential Media(분별배지)

1. Introduction
-이번 실험은 Streaking(획선평판법)으로 Selective media(선택배지)와 Differential media(분별배지)에서 시료안에 있는 특정 미생물을 순수 분리하는 것이다.
-Streaking(획선평판법)이란 고체배지(agar)에 백금이로 균을 분주하고 배양하여 단일균주집락(single colony)를 얻는 방법이다.
-배지(media)에는 미생물의 생장에 필요한 영양물질을 포함하고 있다. 배지에는 크게 액체배지(Broth)와 액체배지에 한천을 첨가하여 굳힌 고체배지(Agar)가 있다.
-Selective media(선택배지)는 선택한 특정 미생물의 생육을 증진시키고 다른 미생물의 생육이 억제되도록 만들어진 배지이다.
-Differential media(분별배지)는 생장이나 대사물의 차이에 기초하여 서로 다른 미생물을 구별하기 위해 사용되는 배지이다.

2. Materials
1) reagent
Selective media - LB(Luria-Bertani) agar + Ampicillin, LB agar, MRS-maltose, Differential media - MRS-sucrose, TDCA, BCP agar
2) apparatus
백금이(loop), incubator, anaerobic jar, 알코올램프, 에탄올
3) sample
Escherichia coli, Lactobacillus casei, Streptococcus thermophilus,
Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii

3. Methods
-무균상태의 클린벤치에서 백금이를 99% 에탄올을 묻혀 알코올램프로 가열하여 멸균시킨다.
-사용할 균이 있는 액체배지를 vortexing시킨다.
-알코올 소독으로 손에 있는 균을 제거한다.
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