[미생물 실험] 미생물의 현미경관찰 - gram positive, negative

[미생물 실험] 미생물의 현미경관찰 - gram positive, negative

▶ 실험 날짜 : 2013. 9. 30

▶ 실험 준비물
-실험기구 및 도구 : 현미경, Pipet, 알코올램프, 슬라이드 글라스, 커버글라스 ,펜
-crystal violet, iodine, 95%ethanol, safranine, emulsin oil
-관찰할 미생물 : Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis
▶ 실험과정
1. 프레파라트 제작하기
① 우선 준비된 4개의 슬라이드 글라스에 헷갈리지 않도록 펜으로 균주명을 적어놓는다.
그리고 프레파라트 제작 후 현미경 관찰과정에서 쉽게 균들을 관찰할 수 있게끔 펜으로 균을 놓을 곳의 뒷면에 원을 그려서 영역을 표시해준다.
② Smear- 4개의 튜브에 들어있는 각각의 균들을 Pipet을 이용하여 일정량( 을 각각의 슬라이드 글라스 위에 놓는다. 사용한 피펫팁은 알코올램프에 살짝 데어주어서 균에 의한 오염을 방지한다.
③ 알코올램프를 켜고 균이 올려진 슬라이드글라스의 뒷면을 알코올램프에 물기가 없어질 때까지 살짝 가져다대댄다.
④ Staining- 먼저 준비된 Crystal violet을 슬라이드글라스위의 균에 놓는다.
⑤ washing- 약 1분후에 슬라이드 글라스의 뒷면을 약하게 흐르는 물에 대어줘서 Crystal violet을 씻겨준다.
⑥ iodine 처리 - iodine을 Pipet을 이용해서 슬라이드글라스위의 균에 놓는다.
⑦ washing- ethanol로 iodine을 씻겨낸다.
⑧ counter staining - safranin을 Pipet을 이용해서 슬라이드글라스위의 균에 놓는다.
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